产品描述
DNase I是一种内切DNA酶,可以将单链、双链DNA降解为5’磷酸基团、3’羟基末端的单脱氧核苷酸或者寡核苷酸。DNase I的活性依赖钙离子,能够被镁离子和二价锰离子激活。镁离子存在条件下,DNase I可随机剪切双链DNA的任意位点;二价锰离子存在条件下,DNase I可在同一位点剪切DNA双链,形成平末端,或1-2个核苷酸突出的粘末端。
主要用途:制备不含DNA的RNA样品;
RT-PCR反应前RNA样品中基因组DNA残留去除;
体外T7,T3,SP6等RNA Polymerases催化的RNA转录后体系中DNA模板去除;
缺口平移(nick translationin)DNA标记;
产生DNA随机片段文库;
细胞凋亡Tunel检测中部分剪切基因组DNA作为实验阳性对照等。
特点:特异性降解DNA,不能降解RNA。
来源:携带Bovine Pancreatic DNase I基因的毕赤酵母菌株重组表达。
酶活性定义:在37℃孵育10分钟将1 µg的pBR322载体DNA全部降解所需酶量定义为一个酶活单位。
失活或抑制:75℃加热10 min可使DNase I充分失活。
纯度:SDS-PAGE检测纯度≥95%,无RNase;10 U/μL。
酶储存缓冲液:25 mM Tris-HCl, 2 mM CaCl2, 50% glycerol, pH7.6。
10×Reaction Buffer:100 mM Tris-HCl, 25 mM MgCl2, 5 mM CaCl2, pH7.6。
储存与运输
低温运输;-20℃保存,12个月有效;
参考使用
1、RNA样品中去除DNA残留参考反应体系:
2、按上述体系设置好之后,轻轻混匀,随后将液体离心至管底。
3、37℃孵育30 min,反应完后在反应体系中加入0.5 μL 25 mM EDTA终止反应。
4、75℃孵育10 min使DNase I完全失活。
注意事项
1,在使用该产品时应将酶存放在冰盒内或冰浴上,使用完毕后该立即于-20ºC保存。
2,为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
3. 本产品仅供科研用途,不用于临床诊断!